е окрашивание, интенсивность которого пропорциональна концентрации глюкозы.

259

г

Реактивы: 1) ортотолуидиновый реактив (0,15 г ти-омочевины растворяют в 94 мл ледяной уксусной кислоты и смешивают с 6 мл бесцветного или слегка желтоватого ортотолуидина; ортотолуидин очищают путем перегонки; реактив стоек, хранят на холоду);

2) 3% раствор трихлоруксусной кислоты;

3) стандартный раствор глюкозы 5000 мг/л (в мерной

колбе вместимостью 100 мл растворяют 500 мг высушенной до постоянной массы при температуре 100° С глюкозы

в 0,2% растворе бензойной кислоты; для приготовления

раствора бензойной кислоты отвешивают 0,2 г кристаллической бензойной кислоты и растворяют ее в небольшом

количестве дистиллированной воды, которую нагревают

на водяной бане до полного исчезновения кристаллов;

после охлаждения до комнатной температуры раствор

переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, и доливают до метки дистиллированной водой; хранят в холодильнике).

В качестве материала для исследования используют кровь и мочу с положительной качественной пробой на глюкозу. Исследуемую мочу разводят дистиллированной водой (степень разведения 2—10 раз в зависимости от характера качественной реакции).

Ход определения. В пробирку наливают 0,9 мл 3% раствора трихлоруксусной кислоты и выдувают (на ее стенку) 0,1 мл крови. Встряхивают и центрифугируют. К 0,5 мл центрифугата добавляют 4,5 мл ортотолуидинового реактива. Пробирку со смесью помещают в кипящую водяную баню на 8 мин (точно), вынимают, охлаждают под водопроводной водой до комнатной температуры. ^ Экстинкцию измеряют на ФЭКе при длине волны 590— *650 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм против контроля. Контроль. 0,5 мл трихлоруксусной кислоты и 4,5 мл ортотолуидинового реактива.

Стандартная проба. Ставят как опытную, но вместо сыворотки берут стандартный раствор глюкозы с концентрацией 1000 мг/л (3000 или 5000 мг/л в случае высокого содержания глюкозы в крови). Расчет ведут по формуле:

.Г* .Г*f J-* " ~ „— о о о о о о о о о о 00 -J о и, WW — ©"^ оо VjOv'UV w к>*— о

OOgOO>;

§1 §§ls?SSЗCo^KЬ!««:2Sй:iЙ

KJtON»tOrOt.JUlf*lUl

ООО

оооойооооообообебооб

— S^O D0CO0O—S

ooooooooooSooaSoa

o>

to

3

где C0„ — концентрация глюкозы в крови, мг/л; концентрация глюкозы в стандарте, мг/л; экстинкция пробы; Е„ — экстинкция стандарта.

Определение глюкозы в моче производят так же, как и в крови. При расчете результатов учитывают степень разведения мочи.

260

o-SSoSlgoeSScfoSoggoeS

Содержание глюкозы в крови здорового человека составляет 3,34—5,55 ммоль/л. Коэффициент пересчета в единицы СИ (ммоль/л) равен 0,00555.

Глава IV ЛИПИДНЫЙ ОБМЕН

ПОКАЗАТЕЛИ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩИЕ СОСТОЯНИЕ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА

§ 125. Понятие об общих липидах и их фракциях

В состав клеток и тканей организма человека вместе с белками и углеводами входят жиры и жироподобные вещества, объединенные в большую группу органических соединений, называемых липидами. Они нерастворимы в воде, но растворяются в органических растворителях (этанол, эфир, хлороформ), разнообразны по химическому строению. В группе липидов выделяют: жирные кислоты, триацилглицерины (нейтральные жиры), сфинголипиды, фосфолипиды, стероиды, липопротеиды.

Физиологическая роль липидов в организме многообразна. Жирные кислоты используются как энергетический

и строительный материал для нейтральных жиров, фосфо-й

липидов, сфинголипидов, эфиров холестерина и др. j

Важную группу ненасыщенных жирных кислот сосгав-jj ляют простагландины. Они обладают высокой биоло-| гической активностью. Их действие можно сравнить с™ действием гормонов и медиаторов (веществ, участвующих в передаче нервного возбуждения). Простагландины влияют на скорость кровотока в капиллярах, сократимость гладкой мускулатуры матки и желудочно-кишечного тракта, агрегацию (склеивание) тромбоцитов, участвуют в . воспалительных реакциях организма. Изучение этих веществ чрезвычайно важно в целях диагностики целого ряда заболеваний и использования в качестве лекарственных препаратов.

Триацилглицерины входят в состав цитоплазмы клеток (протоплазматический жир). Они содержатся, главным образом, в форме запасного или резервного жира в подкожной жировой клетчатке, сальниках, околопочечной жировой капсуле. Представляют собой наиболее концентрированный источник энергии. При окислении 1 г нейтрального жира образуется 38,94 кДж (9,3 ккал), что более чем в 2 раза превышает энергетическую ценность углеводов и белков. Кроме того, при окислении жиров образуется достаточно много воды, поэтому резервный

262

жир можно считать своеобразной формой запаса воды в организме.

Фосфолипиды и сфинголипиды являются основными компонентами клеточных мембран, они обеспечивают проницаемость и активный перенос через мембрану в клетку веществ,, нерастворимых в воде. В большом количестве содержатся в нервной ткани (в миелиновом волокне нерва составляют до 60% сухой массы). Фосфолипидами богата печень, где они образуются из триацилглицеринов и азот