орошке. В этом случае делают навеску 3,8 г и растворяют ее в 250 мл метилового или этилового 96% спирта. В течение нескольких дней раствор вызревает в темном месте. Для лучшего растворения краски его нужно часто взбалтывать. Когда краска растворится приливают 250 мл х. ч. глицерина и вновь оставляют на 3—5 дней, часто помешивая.

Основной раствор краски Романовского концентрирован. Для окраски мазков крови он нуждается в разведении. Разведение может быть различным в зависимости от качества красителя. Наилучшие для окраски разведение и время устанавливают опытным путем.

Титрование краски Романовского. В трех Цилиндрах готовят различные разведения краски из расчета 1 капля концентрированного красителя на 1 мл дистиллированной воды, 2 капли на 1 мл и 3 капли на 1 мл. Каждым из растворов окрашивают 5—6 зафиксированных мазков крови в течение различного времени: 20, 25, 30, 35 и 40 мин. Wa каждом мазке отмечают время, в течение которого он бУдет окрашен. Окрашенные таким способом мазки микроскопируют и определяют то разведение краски и время, при ?которых получена наилучшая окраска. Разведение прини148

работа с иммерсионным объективом производится, когда он погружен в жидкость, нанесенную на поверхность исследуемого препарата. Применяемая жидкость—? иммерсионное масло — должна быть прозрачной и преломлять световые лучи так же, как линзы объектива. Для создания однородной среды между препаратом и объективом иммерсионное масло должно обладать достаточной вязкостью, чтобы не растекаться по поверхности препарата- Этими свойствами обладает в наибольшей мере кедровое масло.

Для получения хорошей освещенности поля зрения конденсор поднимают до упора, а диафрагму открывают.

На мазок наносят каплю иммерсионного масла, объектив погружают в него до соприкосновения с препаратом. Под контролем глаза медленным осторожным движением макровинта поднимают тубус до получения изображения. Четкости его добиваются с помощью микровинта.

Лейкоциты располагаются в мазке неравномерно: более тяжелые (эозинофилы, моноциты) встречаются чаще по краю мазка, а более легкие (лимфоциты) — в середине. Поэтому подсчет следует вести как по середине, так и по краю мазка в тонкой его части, где хорошо просматривается структура клеток.

Считают все встречающиеся лейкоциты, дифференцируя их по видам. Всего сосчитывают 200 клеток, подсчитывают число лейкоцитов каждого вида и деляг на 2, чтобы получить количество их относительно 100 клеток, т. е. процентное соотношение. Наиболее употребительный метод подсчета заключается в том, что по верхнему и нижнему краю мазка сосчитывают по 100 клеток, двигая его по ломаной линии. Просмотрев 5—6 полей зрения по краю, мазок передвигают на 5—6 полей зрения к середине стекла, а затем в сторону на столько же и возвращаются к краю. Снова просматривают край и т. д. (рис. 43,а).

Можно также подсчитывать клетки в начале мазка от края до края поперек него, затем 5—6 полей зрения по краю и снова поперек мазка, потом по противоположному краю и т. д., пока не будет сосчитано 200 клеток (рис. 43, б).

Регистрация лейкоцитов во время подсчета^ Наиболее удобен для регистрации клеток при подсчете лейкоцитарной формулы счетчик лабораторный СЛ-1 (рис. *4). Это простейший арифмометр, снабженный 11 клавишами. Восемь клавиш имеют буквенные обозначения, соответствующие определенным лейкоцитам, а три с Цифровыми обозначениями «2», «3» служат резервными и могут быть использованы для регистрации различных патологических элементов.

При нажатии клавиши в смотровом окне, расположен151

Рис. 43. Техника подсчета лейкоцитарной формулы. Объяснение

тексте.

|1|2|3|М|Ю|П| С |Э |М0Н| Б | Л ~|

названий встретившихся лейкоцитов. Когда вся сетка заполнена, т. е. сосчитано 100 клеток, подсчитывают количество лейкоцитов каждого вида, получая их процентное соотношение. Подсчет производят дважды и выводят среднее арифметическое.

§ 62. Определение количества тромбоцитов

Тромбоциты (кровяные пластинки) могут быть подсчитаны в окрашенных мазках крови, счетной камере или с помощью автоматического счетчика.

Подсчет тромбоцитов в мазках крови по Фонио. Метод основан на определении количества тромбоцитов, встречающихся при подсчете 1000 эритроцитов.

Реактив: 14% раствор сульфата магния или 6% раствор этилендиаминтетраацетат натрия (ЭДТА). Эти реактивы предотвращают аггрегацию и адгезию тромбоцитов, способствуя равномерному их распределению в мазке.

Техника приготовления мазков. Капилляр Панченкова промывают одним из указанных растворов. Набирают реактив до метки 75 и переносят его в серологическую пробирку. Кровь из пальца берут тем же капилляром до метки 0 («К») и перемешивают ее с реактивом.

Одновременно берут кровь для подсчета эритроцитов.

Из смеси крови с реактивом готовят тонкие мазки, высушивают их на воздухе, подписывают, фиксируют и окрашивают краской Романовского в течение 1—2 ч. Краску смывают водопроводной водой, мазки высушивают на воздухе. При окраске по Романовскому тромбоциты окрашиваются в фиолетов