1 З-З'/г '5/,б 3'/2-4 Vs

Фотометрический метод. Основан на том, что белок с сульфосалициловой кислотой дает помутнение, интенсив-ностЛ которого прямо пропорциональна концентрации белка. Материалом для исследования служит моча в количестве, не менее 2,5 мл.

т.,.РДапКаГс?ВЬ1: ^ 3% Раств°Р сульфосалициловой кисло-ы, i) и,У% раствор хлорида натрия; 3) 1% стандартный раствор альбумина.

Ход определения. 2 мерные центрифужные про-оирки помечают: «О» —опыт и «К» —контроль. В обе прооирки наливают по 1,25 мл профильтрованной мочи. В опытную прибавляют 3,75 мл (до метки 5) 3% раствора

2.325 - зз

сульфосалициловой кислоты, в контрольную ^3,75 мл (до метки 5) 0,9% раствора хлорида натрия. Оставляют на 5 мин, а затем фотометрируют на ФЭКе при длине волны 590—650 нм (оранжевый или красный светофильтр) в кювете с толщиной слоя 5 мм против контроля. Расчет ведут по калибровочному графику.

Построение калибровочного графика. Гото вят стандартный раствор альбумина. Для этого отвешива ют 1 г лиофилизированного, высушенного до постоянно массы, альбумина и растворяют его в небольшом количе1 стве хлорида натрия в мерной колбе вместимостью 100 мл После растворения объем жидкости в колбе доводят д< метки хлоридом натрия. Для стабилизации к реактив; добавляют 1 мл 5% азида натрия. Приготовленный такш образом реактив годен к употреблению в течение 2 мес при условии хранения в холодильнике.

В 1 мл раствора содержится 10 мг альбумина. Из стандартного раствора готовят разведения. В 5 градуиро-ванных пробирок наливают соответственно 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 и 1 мл стандартного раствора альбумина. В каждую пробирку доливают до объема 10 мл 0,9% раствора хлорида натрия. Концентрация белка в этих растворах соответственно составит 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 и 1 г/л. Каждую пробу обрабатывают как опыт. Измерения производят на ФЭКе и регистрируют показатели экстигасции, которые используют для построения калибровочного графика (подробно см. § 109).

Г люкоза Качественные пробы

При проведении общеклинического анализа мочи обязательным является определение глюкозы, которое прово дится несколькими методами. Наиболее часто в клинической лаборатории пользуются пробой Гайнеса, а также экспресс-методами с применением готового набора реактивов или с помощью индикаторной бумаги «Глюкотест» или «АГ-ФАН» (ГДР).

Проба Гайнеса. Эта проба относится к широко распространенным редукционным методам и ^снована на способности глюкозы при нагревании в щелочной среде восста навливать дигидроксид меди (желтого цвета) в моногид-роксид меди (оранжево-красного цвета).

Реактив Гайнеса готовят по следующей прописи

1) 13,3 г кристаллического сульфата меди (х. ч.) ра створяют в 400 мл дистиллированной воды;

2) 50 г гидроксида натрия растворяют в 400 мл дисти-й лированной воды;

34

3) 15 г глицерина растворяют в 200 мл дистиллированной воды;

4) смешивают 1-й и 2-й реактивы; к ним приливают третий; полученный реактив стоек.

Ход определения. В химическую пробирку вносят 4 мл реактива Гайнеса и добавляют 8—12 капель мочи. Нагревают в водяной бане или над пламенем горелки до кипения. В присутствии глюкозы появляется желтая или оранжевая окраска жидкости и осадок.

В связи с достижениями медицинской науки в лабораторной диагностике заметна тенденция к совершенствованию принципов исследования и к упрощению методик их выполнения. Поэтому в работе клинической лаборатории широкое применение находят разнообразные экспресс-тесты. Основные положения по использованию экспресс-тестов будут изложены в специальном параграфе, в том числе и использование экспресс-тестов для определения глюкозы В моче. Количественное определение

К количественному определению глюкозы приступают только после положительной качественной реакции. Количество глюкозы определяют поляриметрическим методом или по цветной реакции с ортотолуидином.

Поляриметрический метод. Основан на способности глюкозы вращать плоскость поляризованного луча вправо. -Это свойство и положено в основу действия прибора-поляриметра (рис. 8), схема которого представлена на Рис. 9.

Световой луч от источника света (1), прошедший через призму Николя (поляризатор), называется поляризованным. Все волны такого луча идут в одной плоскости, 'люкоза отклоняет поляризованный луч вправо, и чем °Ольше глюкозы содержится в моче, тем больше угол

35

отклонения луча. По углу отклонения (вращения) поляр|Я зоваиного луча можно определить количество глюкозы.И На пути поляризованного луча на определенном расН стоянии от призмы-поляризатора (2) находится в приборИ вторая призма-анализатор (5), оптическая ось которое параллельна оси поляризатора. Если между поляризатор ром и анализатором поставить кювету с дистиллированной водой, плоскость поляризации останется без изменений и поле зрения, наблюдаемое через окуляр (7), будет равномерно освещено. Если же в кювету (3, 4) налить жидкость, содержащую оптически активное вещество, то плоскость поляризации изменится, и поляризованный луч отклонится на оп