ановления строения гликоалкалоидов широко используются методы УФ, ИК, ПМР спектроскопии.

§ 4. Качественное определение

Для обнаружения стероидных алкалоидов и их агликонов в растительном сырье применяются реакции осаждения и окрашивания, а также хроматографические методы анализа (тонкослойная, бумажная хроматография).

Гликоалкалоиды осаждаются холестерином, дигитонином; дают реакции окрашивания с /i-оксибеизальдегидом, анисовым альдегидом, резорцином, формальдегидом. Наиболее часто используется реакция Альберта (формальдегид в сильнокислой среде) — в присутствии гликоалкалоидов появляется малиново-красное окрашивание.

При обнаружении стероидных алкалоидов методом бумажной

(

хроматографии используются различные смеси растворителей: ме-тилэтилкетон, насыщенный водой; «-бутанол — уксусная кислота — вода (10:2: 5); к-бутанол — пиридин — вода (10 : 2 : 5) и др. Для обработки хро.чатограмм чаще всего применяются реактив

1

[ Драгендорфа (оранжевые пятна) или концентрированный хлоро-i формный раствор треххлвристой сурьмы с последующим непродолжительным нагреванием при 105 =С (кирпично-красное окрашивание).

При применении тонкослойной хроматографии в качестве сорбентов используют силикагель. Системы растворителей также весьма разнообразны: к-бутанол — метиловый спирт — диэтиламин J (17 : I : 2); хлороформ — метиловый спирт — уксусная кислота (18 : 1 : 1); хлороформ —25%-ный раствор аммиаки (1000 : 1); гексан — анетон (4:1) и др. Хроматограммы обрабатываются парами иода.

Методика качественных реакций. Приготовление, извлечения: измельченное растительное сырье заливают 5%-ным раствором : уксусной кислоты в соотношении 1 : 10, взбалтывают на вибраторе 40 мин, затем отфильтровывают через бумажный фильтр. К. 1 мл

(

извлечения прибавляют несколько капель 1 %-ного раствора холестерина в этиловом спирте. Образуется осадок.

§ 5. Количественное определение

Существующие методы количественного определения стероидных алкалоидов можно разделить на следующие группы.

/. Титрометрические методы. Гликоалкалоиды хорошо отти-тровываюгея соляной кислотой с диметиловым желтым, а также потенциометрически с сурьмяным или стеклянным электродами. Недостаток титромегрических методов — длительность промывания технических гликоалкалоидов от аммиака.

2. Методы бронирования. Гликоалкалоиды, имеющие двойную

связь в положении 5, 6, могут количественно бронироваться пири-

дшшульфатбромидом. Этот метод пригоден только для анализа

препаратов соласодина, а не растительного сырья и полупродук-

.тов его производства.

3. «Сахарные» методы. После проведения кислого гидролиза

гликоалкалоидов и осаждения агликонов проводят титрование

отщепившихся Сахаров 0,1 н. перманганатом калия. Недостатком

«сахарных» методов является то, что некоторые сахара могут выпа-

дать в осадок вместе с «сырыми» гликоалкалоидами и, таким обра-

лом, завышать результаты анализа.

4. Гравиметрические методы. ЭТИ метода разработаны в основ-

" ном для препаративных целей и часто комбинируются с колоночной

хроматографией. Если метод не комбинируется с предварительным разделением на колонке, то определяется сумма гликоалкалоидов или их агликонов. Схема метода сводится к следующему: гликоалкалоиды экстрагируют из растительного сырья разбавленным раствором HaS04 с последующим осаждением их раствором аммиака. Полученный осадок гликоалкалоидов обрабатывают кипящим этиловым спиртом и гидролизуют разбавленным раствором НС1 при кипячении. После подщелачивания агликоны исчерпывающе экстрагируют бензолом. Растворитель отгоняют, остаток высушивают при 120 °С до постоянной массы и взвешивают.

5. Колориметрические методы. Хотя стероидные алкалоиды

дают реакции окрашивания со многими альдегидами, для количе-

ственного определения применяется лишь реакция с формальдеги-

дом в силыюкислой среде (малиново-красное окрашивание), так

как окрашивание с другими альдегидами не подчиняется закону

Ламберта — Бера.

Методика количественного определения соласодина в трале паслена дольчатого (Herba Solani laciniati) (OCT 64-4-118—74). Методика основана на осаждении гликоалкалоидов аммиаком из уксуснокислого извлечения с последующим потенциометр нче-ским титрованием НС1.

30 г (с точностью до 0,01 г) измельченного сырья (сито № 3) помещают в плоскодонную колбу вместимостью 1,0—1,5 л и заливают 600 мл 5%-ной уксусной кислоты. Колбу с содержимым помещают на нагретую водяную баню и поддерживают внутри колбы температуру 50—60 "С в течение 4 ч при периодическом" помешивании. Во избежание испарения колбу закрывают корковой пробкой, в которую вставляют термометр. Затем уксуснокислое извлечение фильтруют через воронку Бюхнера или складчатый фильтр.

200 мл прозрачного фильтрата помещают в стеклянный стакан вместимостью 400 мл, прибавляют 60 мл 25%-ного раствора аммиака и нагревают на водяной бане до температуры внутри стакана 60— 65 "С. Охлаждают на льду в течение 2—3 ч и выпавшие технические гликоалкалоиды отфильтровывают с помощью воронки Бюхн