ом 13 X X 18 см; камера хроматографическая для ТСХ; весы лабораторные аналитические; весы ручные; сата с диаметром отверстий 1 мм; шкаф сушильный лабораторный; УФ лампа; центрифуга лабораторная; спектрофотометры СФ-4А, СФ-16; бани водяные лабораторные; штативы для делительных воронок.

СН-СН8СН3 СНА О=С-С-СН^Н~С-С=О

ОН 1 ?СН«—О

Методика количественного определения платифиллина в траве крестовника плосколистного (ИегЬа Senecionis platyphyltoidis). Крестовник ллосколистный (Senkio platyphijlloides Somm. et. Lev) сем. астровых — Astcraceae (сложноцветных — Compositae) содержит алкалоиды — производные пирролизидинэ (платифиллин, сене-иифиллин). В растительном сырье они содержатся в основном в виде N-оксидов:

СН—СН,СН3 СНЯ О=О-А—СН.—Ы—с-с=о

ц

ПЯЗТНфИЛЛпН

плат,^фнллил 14-оксил

По данной методике проводится определение платифиллина в восстановленной форме хроматофотоэлектроколориметрическим методом.

Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц 2 мм, берут навеску сырья массой 20 г (с погрешностью не более 0,01 г), помешают в колбу вместимостью 1 л, заливают 500 мл

г иинковоЙ пыли, смесь пере-

стоять в течение 6 ч при периодическом встряхивании и затем кислотное извлечение, фильтруют через бумажный фильтр.

100 мл фильтрата помещают в делительную воронку, подщелачивают концентрированным раствором аммиака (по фенолфталеину) и алкалоиды исчерпывающе извлекают этиловым эфиром порциями 70, .10, 30 мл и т. д. (пробы на полноту извлечения с I %-иым раствором кремневольфрамовой кислоты). Эфирные извлечения объединяют, сушат безводным Na3S04, отфильтровывают и отгоняют досуха на водяной бане. Сухой остаток растворяют в 5 мл хлороформа. 0,05 мл полученного раствора наносят на линию старта стеклянной пластинки размером 6 X 18 см с закрепленным слоем силикагеля марки КСК. Пластинку с нанесенной пробой высушивают на воздухе в течение 5—10 мин, а затем помещают в хроматографическую камеру с метиловым спиртом и хроматогра-фируют восходящим способом. Когда фронт растворителя дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат сначала па воздухе в течение 5 мин, затем в сушильном шкафу 30 мин при температуре 50 °С, охлаждают на воздухе и опрыскивают реактивом Драгендорфа. При этом на пластинке должно появиться пятно платифиллина (Ri около 0,36) и выше — пятно сенецифиллина (Rt около 0,50). Проявленное пятно платифиллина обводят препаровальной иглой. Отмеченный участок счищают в делительную воронку вместимостью 50 мл, в которую затем прибавляют 15 мл 1%-пой НС1 и встряхивают в течение 3 мин. При этом образовавшийся на адсорбенте комплекс алкалоида с реактивом Драгендорфа разрушается. Затем в воронку прибавляют 0,2 мл 1 %-ного раствора тропеолина 000 ~ И и 10 мл хлороформа, вновь встряхивают в течение 3 мин и окрашенный хлороформный слой, содержащий соединение алкалоида с тропеолигюм, фильтруют через бумажный фильтр, предварительно смоченный хлороформом, в мерную колбу вместимостью 50 мл. Экстракцию хлороформом повторяют еще Два раза, объем раствора в колбе доводят дометни хлороформом, перемешивают и интенсивность окраски раствора определяют при помощи фотоэлектроколориметра ФЭК-56М со светофильтром № 5 ' (К = 490 нм) на фоне хлороформа в кювете с толщиной слоя 10 или 50 мм в зависимости от интенсивгюсти окраски раствора. Количество платифиллина в пятне хроматограммы в мкг находят по калибровочному графику. Процентное содержание платифиллина в виде основания в абсолютно сухом сырье х вычисляют по формуле

аИОО-5-100

Vtm- I 000 000(100 — w) '

где а—содержание алкалоидов в пятне хроматограммы, найденное по калибровочному графику, мг; V — объем хлороформного раствора, L полученного при растворении сухого остатка, мл; V1 — объем хлоро-I"формного раствора, нанесенного на хроматограмму, мл; т — масса \.навески сырья, г; ЕВ — потеря МЕССЫ сырья при высушивании, %.

Содержание платифиллина-основания должно быть не менее |0,3 %.

153

152

При необходимости посла хроматографического разделения я проявления алкалоидов аналогичным способом можно определить секецифилЛйН, пользуясь тем же калибровочным графиком.

Пост р о елке калибровочного графика, 0,2890 г (точная

навеска) гидротарграта пяатяфиллина помещают в мерную колбу вместимостью

100 мл, растворяют э 50 ил дистиллированной воды, объем раствора доводят

до метки ЭТИЛОВЫМ спиртом и леремедшвают. Получают таким обра-

в ом 0,2%-аый исходный раствор платифиллина-оаговання. Для построения калибровочного графика, рассчитанного на работу в кюве-уе с толщиной слоя раствора 50 мм, наносят на стартовую линию хроматограммы в равные точки (0,01; 0.02; 0.03; 0,04; 0,05; 0,06; 0,07 мл) исходного рнствора, что соответствует 20, 40+ 60, 80, 100, 120 и НО мкт платифиллина-оскования,, и далее анализируют, как описано выше. Для кюветы с толщиной слоя раствора 10 мм берут 0,05; 0J0; 0,15, 0,20; 0,25 мл исходного раствора, что соответствует 100, 200, 300, 400 и 500 мкг платифиллииа основания, и далее анализируют, как описано выше.

При ггостро