м. При наличии конденсированных дубильных веществ они выпадают в осадок. Осадок отфильтровывают. К 2 мл фильтрата добавляют 10 капель 1 %-ных железоаммониевых квасцов и около 0,2 г кристаллического ацетата свинца, раствор

НА

перемешивают, В случае наличия гидролизуемых дубильных веществ появляется синее или фиолетовое окрашивание (в нейтральной среде).

5. К 2—3 мл извлечения прибавляют по каплям бромную воду (5 г брома D 1 л воды) до того момента, когда в жидкости станет ощущаться запах брома. При наличии конденсированных дубильных веществ сразу образуется осадок.

6. К 1 мл извлечения добавляют 2 мл 10 %-ной уксусной кислоты и 1 мл 10 %-ной средней соли ацетата свинца — гидролизуемые дубильные вещества образуют осадок. При наличии конденсированных дубильных веществ фильтрат окрасится в черно-зеленый цвет от прибавления 5 капель 1 %-ных железоаммониевых квасцов и 0,1 г ацетата свинца.

7. К 2 мл извлечения прибавляют несколько кристаллов NaN03 и 2 капли 0,1 н. НС1. При наличии гидролизуемых дубильных веществ появляется коричневое окрашивание

Хролштографическое определение (катехинов листа чая ТСХ), 0,1 г измельченного

сырья (лист чая) заливают 2 мл 95 %-ного

этилового спирта и нагревают на водяной

бане до кипения, охлаждают, фильтруют. Полученный этанольный экстракт наносят

с помощью капилляра на стартовую линию

хроматографической пластинки «Силуфолэ

(высота столбика жидкости в капилляре

1,5—2 см; диаметр пятна на стартовой линии

не более 5 мм). Рядом с исследуемым экстрактом на стартовую линию наносят в качестве

{ — ИЗВЛЕЧЕНИЕ из лио ТЬЕВ ЧАЯ; 2 — очищенная сумма катехииов; а — i+) КАТАХИИЫ; б'— rq:} эттнкнтсхип

«свидетеля» раствор очищенной суммы катехинов листа чая. После высушивания пластинку помещают в хроматографическую камеру с системой растворителей «-бутанол — уксусная кислота — вода (40 : 12 : 28). Хроматографировапие проводят в течение 1,5 ч (пробег фронта растворителя 10—12 см). Затем хроматограмму высушивают на воздухе и обрабатывают раствором 1 %-ного ванилина в концентрированной НС1. Катехины проявляются в виде красно-оранжевых пятен (рис. 24).

§ 5. Количественное определение

В литературе описано около 100 различных способов количественного определении дубильных веществ, которые можно подразделить на следующие основные группы.

1. Гравиметрические — основаны на количественном осаждении дубильных веществ желатиной, нонами тяжелых металлов или адсорбцией гольевым порошком.

119

2. Титрометрические — на окислительных реакциях, прежде всего с применением перманганата калия {метод ГФ X).

3. Фотоколориметрические — на реакциях с солями окисного железа, фосфорновольфрамовой кислотой, с реактивом Фолина — Дениса и др.

4. Методы кефелометрические, хроматоспектрофотометрические в основном используются в исследованиях.

В СССР и за рубежом стандартным для технических целей является гравиметрический метод с применением гольевого порошка .весовой единый метод (ВЕМ)1.

В ГФ X входит титрометрический метод Левенталя в модификации А. Л. Курсанова, основанный на способности дубильных веществ быстро окисляться перманганатом калия.

Для количественного определения танина в листьях скумпии и сумаха предложен метод осаждения дубильных веществ сульфатом цинка с последующим комплексопометрическим титрованием.

Для количественного определения катехинов в листе чая М. Н. Запрометовым разработан фотоколориметрический метод с использованием бумажной хроматографии для разделения катехинов и реакции катехинов с 1 %-ным ванилином в концентрированной HCI, в результате которой образуется окрашенный раствор.

Методика количественного определения дубильных веществ (ГФ X). Около 2 г (точная навеска) измельченного сырья, просеянного сквозь сито с диаметром отверстий 3 мм, помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, заливают 50 мл кипящей воды и нагревают на водяной бане в течение 30 мин при частом . перемешивании. Жидкость отстаивают в течение нескольких минут и осторожно процеживают через вату в мерную колбу вместимостью 250 мл так, чтобы частицы сырья не попадали на пату. Сырье в колбе повторно извлекают кипящей водой, как указано выше, процеживая жидкость в ту же мерную Колбу, Извлечение повторяют несколько раз до отрицательной реакции на дубильные вещества (проба с раствором железоаммониевых квасцов). Жидкость в мерной колбе охлаждают и объем извлечения доводят водой до метки. 25 мл полученной жидкости помещают в коническую колбу вместимостью I л, добавляют 750 мл воды и 25 мл раствора индигосульфокислоты и титруют при постоянном перемешивании 0,1 н. перманганатом калия до золотисто-желтого окрашивания.

1 мл 0,1 н, раствора перманганата калия соответствует 0,004157 г дубильных веществ в пересчете на танин. Параллельно проводят контрольный опыт, титруя 25 мл индигосульфокислоты в 750 мл воды.

Процентное содержание дубильных веществ определяют по формуле

_(Vi — У а) ЛГРУ10О-100 Х~ mV8(100 —ю)

где Vj —объем 0,1 н. KMn04l пошедшего на титрование, мл;