игольчатого папоротника; 2 — раствор сырого фи^нцннг из корневищ мужского папоротника: а — аслидин; б — дезаели-дин; з —аспидкнол; гг, — фланасиндовая кислота (тау-томерные формы): д — аль-баснидин

5. Хроматографическое определение.

На пластинку «Силуфол», пропитанную

лимонно-фосфатным буфером (рН 6,0), с

последующим активированием пластинки

при температуре 70—80 "С (1 ч) наносят

1 %-ный сырой филицин из мужского па-

поротника (5—6%-ный раствор из иголь-

чатого папоротника) в хлороформе капил-

ляром в одно касание на стартовую линию

хроматографической пластинки, высота

жидкости з капилляре 1,5—2 см, диаметр

полученного пятна 2—3 мм. Высушенную

пластинку помещают в хроматографиче-

скую камеру со свежеприготовленной, на-

сыщенной системой к-гексан — хлороформ

(1 : 1) с 5 % этилового спирта. Время

хроматографирования 1 ч. Хроматограмму

высушивают на воздухе и просматривают

в УФ свете, отмечая зону флуоресценции.

Проявляют флороглюциновые производ-

ные реактивом Паули по Кутачеку, отме-

чая цвет пятен (рис. 11).

ас пидинол, дезас-

В мужском папоротнике обнаруживаются не менее 6 пятен, из них идентифицированы флаваспидовая кислота, ас-пидинол, альбаспидин; в игольчатом папоротнике не менее 8 пятен, для 4 из них установлено строение (флаваспидовая кислота, иидин и аспидин).

Хроматографическое разделение можно проводить в тонком слое сцликагеля марки КСК, смешивая 4 г силикагелп с 10 мл лимонно-фосфатного буфера с рН 6,0 и последующим активированием пластики в течение 1 ч при t — 105—110 "С в той же системе.

§ 10. Количественное определение

65

Методы количественного определения производных флороглю-цина ограничивались в фармакопеях различных стран только определением сырого филицина. В литературе имеются сведения о разработке хроматоспектрофотометрических методов определения фло-

3 n/р Гринкевич а др.

роглюцидов в кристаллическом порошке и сырье, в частности для флаваспидовой, ацетилфлаваспидовой кислот, аспидина, аспиди-нола. Метод основан на способности поглощать фенольные соединения в УФ области при определенных длинах волн, характерных для этого класса соединений.

Методика определения суммы сырого филицина из корневищ мужского папоротника —- Rhizoma Filicis maris (Dryopieris filtx mas L.) (ГФ X, ст. 584). 50 г порошка корневищ экстрагируют около 2 ч в аппарате Сокслета этиловым эфиром до тех пор, пока эфир не будет стекать бесцветным и 10 мл эфирного извлечения не перестанут оставлять при испарении видимого остатка. Извлечение фильтруют, эфир отгоняют на водяной бане до 30 мл, после чего остаток взбалтывают в делительной воронке с 30 мл насыщенного раствора гидро-ксида бария в течение 5 мин. После разделения слоев водный слой фильтруют. 24 мл фильтрата (40 г сырья) смешивают с 4 мл концентрированной НС1 и последовательно взбалтывают с 30, 20, 15 мл этилового эфира. Объединенные эфирные извлечения обезвоживают 4 г безводного Na2S04 и фильтруют через складчатый фильтр во взвешенную колбу. Сульфат натрия и фильтр промывают этиловым эфиром дважды по 10 мл. Эфир отгоняют на водяной бане, а остаток - сушат в течение 1 ч при 100 °С. Процентное содержание филицина х рассчитывают по формуле

alOO-ЮО

т(Ш — ы>)

где а — количество сырого филицина, полученного после отгонки этилового эфира, г; m —- масса навески сырья, вычисленная по отмеренному объему фильтрата, г; w — потеря в массе сырья при высушивании.

Содержание сырого филицина в корневищах должно быть не менее 1,8 %.

Реактивы и оборудование: лимонная кислота; натрия фосфат двузамещепный; Ва(ОН)а; стрептоцид белый; NaN02; FeClB; rCjFe(CN)e; ванилин; хлороформ; н-гексан; этиловый спирт (этанол); н-бутанол {бутанол-]); НС1 (конц.); этиловый эфир; NajSCi4; реактив Пнули но Кутзчеку [белый стрептоцид (3 г); и-бут31ЮЛ (14 мл); HG (кони., 6 мл); вола дистиллированная (200мл), хранятв темной склянке, в реактив перед употреблением добавляют натрий нитрит кристаллический]; лимонно-фосфатныЁ буфер с рН 6,0 (смесь двух растворов {раствор А —0,2 М Na2HP04 и раствор В — 0,1 Л1 лимонной кислоты)]. Для получения 20 мл буфера смешивают 12,63 мл раствора А и 7,37 мл раствора В (рН проверяют по универсальному индикатору).

Аппарат Сокслета; силикагель марки КСК; шкаф сушильный лабораторный; колба круглодонная с нормальным шлифом вместимостью 500 мл; бани водяные лабораторные; воронки стеклянные для фильтрования диаметром 5—, 10 см; холодильник стеклянный лабораторный; фильтры бумажные; пробирки стеклянные; камера хроматографическая для ТСХ; капилляры стеклянные; пластинки «Силуфолв; пластинки стеклянные для ТСХ размером 20 X 20 си; пульверизатор; колбы конические вместимостью 100 ил; весы ручные; весы лабораторные аналитические; ступки фарфоровые с пестиком или кофемолка электрическая бытовая.

Вопросы для подготовки

1. Физико-химические свойства фенольных соединений.

2. Качественные реакции на арбутин и флороглюциды.

3. Хроматографическии анализ.

4. Качественные реакции на фенольные соединения.