возможные примеси: моно- и бисазосоединения. Эталонный образец и «свидетели» очищают до такого состояния, чтобы на электрофореграмме наблюдалась одна зона или в зоне содержалось не менее 90°/» основого вещества.

Приборы. Используют прибор для электрофореза, предназначенный для анализа белков .крови (Институт им. А. А. Богомольца АН УССР, г. Киев), или прибор для электрофореза со специаль-'ными камерами, сконструированными на химическом заводе им. П. А. Войкова, с источником питания УИП-1. Также могут быть использованы аппараты для горизонтального и вертикального электрофореза, предназначенные для фракционирования протеинов, исследований по органической химии, биологических и фармакологических исследований, типа ОЕ-201 (фирма Labor, Будапешт).

Реагенты:

1. Раствор эталонного образца арсеназо III, 0,5%-ный, водный.

2. Растворы «свидетелей» 0,1; 0,25; 0,5% -ные, водные.

3. Раствор анализируемого образца арсеназо III, 0,5%-ный, водный (в случае малой растворимости реагента раствор нагревают на водяной бане или добавляют 1%-ный раствор NaOH до полного растворения).

4. Растворы электролитов: раствор с рН 1,5, содержащий 0,05% щавелевой кислоты и 30% ледяной уксусной кислоты; раствор с рН 1,7, содержащий 0,05% щавелевой кислоты, 5% муравьиной кислоты и 25% ледяной уксусной кислоты; раствор с рН 2„ содержащий 0,1 М раствор монохлоруксусной кислоты; раствор с рН 5,9, содержащий 0,5% щавелевой кислоты и 2,8% пиридина.

Анализ проводят на хроматографической бумаге марки «средняя» ленинградской фабрики им. В. Володарского.

Подготовка камер и хроматографической бумаги. В электродные камеры прибора наливают по 250 мл одного из буферных растворов. Внешние и внутренние части камер соединяют между собой мостиками из одного слоя фильтровальной бумаги и после этого р камеры погружают электроды.

На полосках хроматографической бумаги, не имеющей складок, заломов и загрязнений, длиной 48 см, шириной 18 см, отмечают простым карандашом стартовую линию, отмечая таким образом место нанесения исследуемого раствора. Полоски бумаги смачивают в буферном растворе того же состава, в котором предполагают проводить электрофорез. Далее полоски бумаги слегка отжимают между листами фильтровальной бумаги н помещают на пластинки с шипами, находящимися на дне мостика камеры, таким образом, чтобы погруженные в буферный раствор участки были равны. Закрывают мостик крышкой так, чтобы резиновый ободок плотно прилегал по периметру камеры. Через правую прорезь в крышке микрокапилляром наносят по 0,005—0,02 мл раствора анализируемого арсеназо III, эталонного раствора и растворов свидетелей в виде полос или пятен. Места нанесения растворов на отдельных лентах располагают по одной линии.

Проведение электрофореза и обработка электрофореграмм. Для создания герметичности в мостике, в прорезь в крышке вкладывают резиновую прокладку. Далее включают ток и проводят электрофорез в течение 15 мин — 6 ч током 1—16 ма при напряжении 400 в.

После окончания процесса выключают прибор и электрофоре-граммы извлекают из камер. Концы ленты, которые были погружены в буферный раствор, обрезают и удаляют избыток влаги фильтровальной бумагой и далее подсушивают. Чистоту арсеназо III оценивают непосредственно на электрофореграмме по числу окрашенных зон при сравнении с эталонным образцом и «свидетелями». Препарат идентифицируют' по величине электрофоретиче-ской подвижности при сравнении с эталонным образцом арсеназо III или с литературными данными для соответствующих условий.

В некоторых случаях электрофореграмму разрезают на отдельные зоны, вещество извлекают из полосы водой или разбавленной соляной кислотой и снимают спектры поглощения реагента и его комплекса.

При разделении арсеназо III на приборе со специально сконструированными камерами растворы арсеназо III, «свидетелей» и эталонного образца наносят на сухую хроматографическую бумагу длиной 40 см и шириной 25—40 см на расстоянии 10 см от катодного конца бумаги. Далее бумагу смачивают буферным раствором того же состава, в котором проводят электрофорез, и помещают на стеклянные палочки, находящиеся в камере. Камеру заполняют буферным раствором, закрывают крышкой и проводят разделение при указанных выше условиях в течение 6—12 ч.

Электрофоретический метод контроля качества арсеназо III и его аналогов четко разделяет примеси моноазосоединений и бис-азосоединений, а также изомеров, вследствие различной их подвижности, и позволяет сравнивать чистоту различных образцов реагента.

Цветные реакции и другие методы. О количестве образующегося арсеназо III в процессе азосочетания судят по характерным реакциям с элементами или по изменению окраски раствора в щелочных или сернокислых растворах. Если анализируемый препарат арсеназо III содержит мало примесей, то раствор имеет синюю окраску при малых концентрациях КОН и H2SO4. Большой избыток диазосоставляющих и продуктов их разложения, растворы которых имеют обычно желтый или оранжевый цвет, вместе с синей окраской арсеназо III дает в водных или слабокис